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生化試劑盒
- 多功能氧化酶（MFO）試劑盒-微量法
- 恒遠(yuǎn)生物生化試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域廣泛，涉及酶類、氧化應(yīng)激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機(jī)鹽離子、脂質(zhì)代謝、植物抗逆性等。檢測(cè)樣本類型豐富，涉及多種體液、組織、細(xì)胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測(cè)儀器為酶標(biāo)儀，分光光度計(jì)和熒光酶標(biāo)儀。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高效專業(yè)的生化代測(cè)服務(wù)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、極具競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格，所有這些保證了我們向您提供的最專業(yè)最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。
| 中文名稱 |
多功能氧化酶（MFO）試劑盒 |
| 規(guī)格 | 96樣 |
| 貨號(hào) |
L-753-SH |
| 價(jià)格 | ￥1800 |
| 樣本類型 | 血清，血漿，組織勻漿，細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等 |
| 檢測(cè)范圍 | 詳見說明書 |
| 檢測(cè)方法 |
微量法 |
| 貨期 | 3-5天 |
| 說明書 | 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取 |
| 文獻(xiàn) | 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取 |
注 意 ：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶，可產(chǎn)生降解反應(yīng)，可使原化學(xué)物質(zhì)變?yōu)榈投镜幕驘o毒的物質(zhì)從體內(nèi)排出；還可產(chǎn)生激活反應(yīng)，可使原化學(xué)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為具有親電子性質(zhì)，導(dǎo)致毒性增強(qiáng)，成為致突變物或終致癌物。近年來對(duì)混合功能氧化酶系與外源性化學(xué)物質(zhì)相互作用的深入研究，對(duì)于從分子生物學(xué)水平上進(jìn)一步了解外源性化學(xué)物質(zhì)的毒作用具有重要意義。
測(cè)定原理：
MFO催化對(duì)硝基苯甲醚產(chǎn)生對(duì)硝基苯酚，在400nm下有特征吸光值。
自備用品：
酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰、蒸餾水、氯仿。
試劑組成和配制：
提取液：液體120mL×1瓶，4℃保存;
試劑一：液體24mL×1瓶，4℃避光保存;
試劑二：粉劑×3管，-20℃保存；臨用前取一管加入1.5mL水溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用。
試劑三：液體24mL×1瓶，4℃保存;
試劑四：液體64mL×1瓶，4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
按照組織質(zhì)量（g）：提取液（mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。12000g 4℃離心20min，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟：
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至400nm。
2、在EP管中依次加入如下試劑
|
試劑名稱（μL） |
測(cè)定 |
空白 |
|
試劑一 |
200 |
200 |
|
試劑二 |
40 |
40 |
|
提取液 |
160 |
360 |
|
樣本 |
200 |
|
|
混勻，37℃水浴30min |
||
|
試劑三 |
200 |
200 |
分別加入1000μL氯仿，充分混勻萃取，靜置10min，取下層氯仿層0.6mL至新的EP管中。再加入試劑四0.6mL，充分混勻萃取，取上層水相0.2mL于96孔板中，400nm下測(cè)定吸光值A測(cè)定與A空白，△A=A測(cè)
定-A空白。空白管只需測(cè)一管。
MFO活性計(jì)算:
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0119x + 0.0021，R2 = 0.9997；y，吸光度；x,標(biāo)準(zhǔn)品濃度，單位nmol/mL。
（1）按樣本質(zhì)量計(jì)算
單位定義：每g樣本每分鐘產(chǎn)生1nmol對(duì)硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。
MFO（nmol/min/g 鮮重）=（△A-0.0021）÷0.0119×V總÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=8.4×（△A-0.0021）÷W
（2）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1nmol對(duì)硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。
MFO（nmol/min/mg prot）=（△A-0.0021）÷0.0119×V總÷(V樣×Cpr)÷T
=8.4×（△A-0.0021）÷Cpr
V總：最終萃取液體積，0.6 mL；V樣：反應(yīng)中樣品體積，200μL；T：反應(yīng)時(shí)間，30min；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL。
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在線詢價(jià)
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